一、引言

兒茶酚胺（CAs）是一種含有兒茶酚和胺基的神經(jīng)類物質(zhì)。兒茶酚和胺基通過L- 絡(luò)氨酸在交感神經(jīng)、腎上腺髓質(zhì)和親鉻細(xì)胞位置的酶化步驟結(jié)合。通常，兒茶酚胺是指多巴胺

（DA）、去甲腎上腺素（NE）和腎上腺素（E），而去甲變腎上腺素（NMN，又名甲氧基去甲腎上腺素）、變腎上腺素

（MN，又名甲氧基腎上腺素）和3- 甲氧基酪胺（3-MT）分別是NE、E 和DA 的代謝產(chǎn)物。

尿液中CAs 及其代謝物水平與人體多種生理、病理現(xiàn)象有密切關(guān)系，臨床研究發(fā)現(xiàn)CAs 可以用于臨床輔助診斷高血壓、甲亢、嗜鉻細(xì)胞瘤和神經(jīng)母細(xì)胞瘤等內(nèi)分泌相關(guān)疾病， 其代謝物MN 以及NMN 對(duì)診斷嗜鉻細(xì)胞瘤和神經(jīng)母細(xì)胞瘤有極高的敏感度與準(zhǔn)確度，是內(nèi)分泌指南推薦的首選檢測(cè)指 標(biāo)。

本方案建立了尿液中CAs 及其代謝物測(cè)定方法，并對(duì)其進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證。經(jīng)驗(yàn)證方法定量限為5 ng/mL，低中高三水平加標(biāo)回收率介于90%-110% 之間，低中高質(zhì)控 CV 值小于8%。

圖1 兒茶酚胺及其代謝物分子結(jié)構(gòu)

表1 各組分質(zhì)譜采集離子參數(shù)

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 色譜圖

兒茶酚胺及其代謝物以及其同位素內(nèi)標(biāo)提取離子色譜圖分別見圖二

2.1 校正曲線

E、NE、DA、MN、NMN、3-MT 基質(zhì)校正曲線見圖3，線性范圍2-200 ng/mL，線性相關(guān)性R2 ＞0.998。

從表2 可以看出，不用加標(biāo)濃度下，6 種化合物都有較好的回收率。

表3 尿液中兒茶酚胺及其代謝物日間穩(wěn)定性結(jié)果

該部分實(shí)驗(yàn)從不同批次萃取板中抽取不同孔位進(jìn)行測(cè)試。從目標(biāo)化合物的結(jié)果可以看出，該產(chǎn)品穩(wěn)定性良好。

三、總結(jié)

本方法通過HPLC-MS/MS 對(duì)尿液中兒茶酚胺及其代謝物進(jìn)行聯(lián)合測(cè)定，對(duì)方法回收率、定量限進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并為考察方法穩(wěn)定性進(jìn)行了批間、日內(nèi)、日間穩(wěn)定性等方面的驗(yàn)證，方法穩(wěn)定可靠，靈敏度高，特異性強(qiáng)，滿足檢測(cè)要求。