1 樣品提取 

1) 稱取豬肉2.0g于50mL離心管中，加入濃度為100ppm氟尼辛D3內(nèi)標(biāo)物40μL，再2.0mL 0.1M Na 2 EDTA溶液，渦旋混勻 1min，冰浴超聲提取10min，于4℃ 9000r/min下離心5min，移 上清液于另一15mL離心管中； 

2) 再加入7.0mL 2%甲酸乙腈于50mL離心管中，渦旋5min，于 4℃ 9000r/min下離心5min，合并兩次上清液，用2%甲酸乙腈定 容至10mL； 

3) 將合并定容后的上清液，于4℃ 9000r/min下離心5min，待凈 化。

2 樣品凈化 

1) 上樣：取2.5mL待凈化液過(guò)柱，重力作用下洗脫，收集流出液； 

2) 洗脫：再加625μL 80%乙腈水進(jìn)行二次洗脫，收集流出液，施 加真空排空液體，合并兩次流出液； 

3) 將0.5mL樣品洗脫液和0.3mL H2O加入到樣品瓶中，渦旋混勻， 過(guò)0.22μm有機(jī)濾膜供上機(jī)測(cè)試

3 標(biāo)曲配制 

用空白基質(zhì)配制標(biāo)曲，內(nèi)標(biāo)法定量，標(biāo)曲濃度范圍0.5~100ppb。 

4. 儀器測(cè)試條件（僅供參考） 

色譜條件 

儀器：UPLC/MS/MS (Thermo Fisher TQS Endura ) 

色譜柱： ® CommaSil ODS(2.1mm×50 mm, 1.8 μm) 

柱溫：30 ℃ 

進(jìn)樣量：8 μL 

流速：0.4 mL/min 

流動(dòng)相：A: 水(0.1%甲酸） B: 甲醇（0.1%甲酸） 

表1 梯度洗脫

質(zhì)譜條件 離子源：HESI    電噴霧電壓：3500 V 

鞘氣壓力：40 arb              輔氣壓力：2 arb 

離子傳輸管：380 ℃          輔氣溫度：420 ℃

5 注意事項(xiàng) 

1. 為防止由螯合引起的四環(huán)素化合物的損失，使用0.1M Na2EDTA 緩沖液進(jìn)行水溶液萃取。 

2. 為改善與固體殘留物的相分離，進(jìn)一步降低溫度對(duì)部分目標(biāo)物 的影響（如四環(huán)素類），建議使用低溫離心(4℃)。 

3. 為進(jìn)一步確保蛋白及部分固體殘留物的有效去除，建議使用高 速離心(9000r/min)。 

4. 建議采用加入內(nèi)標(biāo)物，采用空白基質(zhì)配制標(biāo)曲，有利于校正目 標(biāo)分析物的回收率。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

表2. 不同品牌豬肉中19種獸殘加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果（加標(biāo)濃度 16ng/mL，n=3）