SLE 液液萃取柱

本應(yīng)用為將Copure^® SLE 1 mL(Cat.No.COSLE1CC)的液液萃取柱，應(yīng)用于血清中皮質(zhì)甾類藥 ( 氫化可的松和曲安西龍 ) 的快速提取和定量，流程如圖 1 所示。

一、樣品提取

將血清樣品純水稀釋并混勻，使樣品最終的pH接近8.0。取一部分空白稀釋血清備用；剩下的空白稀釋血清加入一定體積的氫化可的松和曲安西龍儲(chǔ)備液，配制成濃度為 1.5 mg/L 的氫化可的松和曲安西龍加標(biāo)血清。
二、SLE 柱凈化
1) 上樣： 向 SLE 柱中加入 1 mL 預(yù)處理的樣品，加負(fù)壓啟動(dòng)流速 (5-15 秒 )，然后讓樣品吸附于填料中約 5 分鐘。
2) 洗脫： 向柱中加入 4 mL 乙酸乙酯，使溶劑通過重力流出并收集洗脫液，然后再向柱中加入 4 mL的乙酸乙酯，收集洗脫液。在收集結(jié)束后加適當(dāng)?shù)恼蜇?fù)壓 (-15" Hg)2 分鐘并收集最終洗脫出的溶劑。
3) 重新溶解： 將上述收集的洗脫液于35 ℃低真空下濃縮，再用緩氮?dú)饬魅コ宜嵋阴ト芤海蛊錆饪s至近干。取 1 mL(60:40, v/v) 的水 / 甲醇定容，供 HPLC 分析。

三、儀器條件

設(shè)備：Waters Alliance 2695
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
檢測(cè)器：Waters 2487 紫外檢測(cè)器
檢測(cè)波長：245 nm
流動(dòng)相：A：0.1 % 甲酸水溶液 B：乙腈
洗脫方式：梯度洗脫
表 1 梯度洗脫條件

柱溫：室溫
流速：1 mL/min
進(jìn)樣體積：20 μL

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表 2 氫化可的松和曲安西龍的回收率